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应用血液细胞分离机治疗小儿血液病，具有年龄小、静脉细、血容量低的难点。我们尝试用CS 3000plus血细胞分离机对10例血液病患儿进行治疗，报告如下。
对象：1997年8月～1998年5月，本院10例患儿，男8例、女2例；平均年龄7.4岁(3～12岁)；体重13～28 kg，平均18 kg。
疾病类型和治疗方式：(1)去除白血病细胞：共6例，其中5例为急性白血病初发患儿（M2 1例、M1 1例、ALL 3例）；另1例为慢性粒细胞性白血病。采集前，6例患儿白细胞总数在(130～240)×109/L。(2)采集外周血造血干细胞：共4例，其中2例是恶性淋巴瘤患儿，进行大剂量化疗+造血干细胞支持，1例神经母细胞瘤和1例横纹肌肉瘤进行自身造血干细胞移植。
血细胞分离机运行过程：(1)运行程序：去除白血病细胞，应用“淋巴细胞收集程序”；采集外周血造血干细胞，应用“小儿单个核细胞收集程序”。(2)采集夹的选择：去除白血病细胞，用粒细胞分离夹（granulo）和粒细胞收集夹（A-35）；采集外周血造血干细胞，用小体积分离夹（SVSCH）和小体积收集夹（SVCC）。(3)初始化：≥20 kg者初始化用盐水；＜20 kg者初始化用红细胞1单位。(4)分离总量和采集速度：去除白血病细胞，分离总量为血容量的2倍；采集外周血造血干细胞，分离总量为血容量的3倍，血容量按100 ml/kg计算［1］。采集时，<6岁者均放置中心静脉插管。采集速度根据静脉畅通情况调整为15～40 ml/min；采集时间为4～6小时。(5)抗凝剂的选用：全部应用酸性枸橼酸盐(ACD-A)抗凝，与分离血流量呈1∶10比例。为预防低钙，每分离1升血流量时，口服10%的葡萄糖酸钙3 ml。
结果：1.与采集相关的并发症：(1)所有患儿被采集时均在父母的陪伴下，全部顺利完成分离量。(2)9例患儿初始化用盐水，1例13 kg体重的患儿初始化用红细胞1单位。10例中无一例出现由于血容量下降所导致的低血压。(3)无一例出现导管阻塞或采集袋凝固。(4)10例中仅1例高白细胞性白血病患儿（WBC达240×109/L），分离开始后30分钟出现低钙症状，表现为手指痉挛、脊背酸痛，经静脉滴注10%葡萄糖酸钙10 ml后，症状缓解，继续分离至结束。(5)10例患儿分离后均出现轻度血色素和血小板降低，血色素平均降低1.5克，血小板平均降低2.5万。
2.分离和采集效果：(1)去除白血病细胞：6例患儿分离前外周血白细胞总数为(130～240)×109/L，一次分离后，外周血白细胞总数下降(30～80)×109/L，平均下降55×109/L。采集袋中所分离的白细胞绝对值达(60～100)×109，平均75×109。(2)造血干细胞的采集：2例恶性淋巴瘤患儿用大剂量阿糖胞苷化疗+粒细胞刺激因子（G-SCF）、1例神经母细胞瘤患儿用OPEC化疗方案［环磷酰胺、长春新碱、顺铂和依托泊甙(VP16)］+G-CSF以及1例横纹肌肉瘤患儿用IE化疗方案（异环磷酰胺和VP16）+G-CSF作为造血干细胞动员方案。经应用SVSCH夹和SVCC夹和小儿单个核细胞收集程序，所有病例均仅采集一次即达单个核细胞(2～4)×108/kg，CD34+细胞达(4～6)×106/kg。
讨论：血细胞分离机可分离各类血细胞，包括粒细胞、淋巴细胞、红细胞、血小板以及造血干细胞等，因此应用这些分离功能可治疗一些血液病。我们就是应用了淋巴细胞收集程序和小儿单个核细胞收集程序进行去除白血病细胞和采集造血干细胞的。用细胞分离机一次性去除大量白血病细胞，既可避免大量白血病细胞在化疗时大量破坏而产生细胞溶解综合症，导致急性肾功能衰竭，又可赢得时间使强化疗及时进行，从而提高白血病的治疗效果；用细胞分离机采集外周血造血干细胞，进行外周血造血干细胞移植或进行大剂量化疗后造血干细胞支持，是治疗难治性白血病或晚期实体肿瘤的有效手段。
细胞分离机在小儿的临床应用方面有一定难度，即静脉细，不易采集；血容量低，分离初易产生血容量骤降而引起低血压及在应用抗凝剂过程中易产生低钙症状等。目前细胞分离机在治疗小儿血液病方面国内报道不多。我们试用CS 3000 plus细胞分离机对血液病患儿进行治疗，并在技术方面进行研究。针对小儿特点，参考国外文献报道［1，2］，我们采取放置中心静脉导管、初始化将红细胞代替盐水、分离速度减慢、应用SVSCH夹及SVCC夹和及时补充葡萄糖酸钙等措施，摸索出了细胞分离机适合儿科患儿应用的方法。只要仔细观察患儿，并采取适合儿科特点的技术措施，血细胞分离机完全可以广泛用于治疗儿科血液病患儿。
作者单位：200092 上海第二医科大学附属新华医院造血干细胞移植科 |
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